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Enregistrement W2908142670 · doi:10.4049/jimmunol.194.supp.206.22

Human regulatory T cell isolation in 55 minutes using EasySep™ Releasable RapidSpheres™ (TECH2P.912)

2015· article· en· W2908142670 sur OpenAlexaff
Andy I. Kokaji, Chuan Sun, Garry MacDonald, Samuel Clarke, Maureen Fairhurst, Allen Eaves, Terry E. Thomas

Notice bibliographique

RevueThe Journal of Immunology · 2015
Typearticle
Langueen
DomaineBiochemistry, Genetics and Molecular Biology
ThématiqueSingle-cell and spatial transcriptomics
Établissements canadiensTerry Fox Research InstituteBC Cancer AgencyStemcell Technologies
Organismes subventionnairesnon disponible
Mots-clésFOXP3IL-2 receptorImmunomagnetic separationCell biologyIntracellularPhenotypeT cellBiologyNegative selectionInterleukin-7 receptorPeripheral blood mononuclear cellImmunologyMolecular biologyChemistryIn vitroImmune systemBiochemistryGene

Résumé

récupéré en direct d'OpenAlex

Abstract The preferred marker for identifying regulatory T cells (Tregs) is FOXP3 but its intracellular localization currently precludes it from being used for isolating viable cells. Human FOXP3+ Tregs are characterized as CD4+ T cells expressing high levels of CD25 and low levels of CD127. We have developed a novel immunomagnetic approach for the isolation of magnetic-particle-free human Tregs from PBMCs in as little as 55 minutes. This offers a vast improvement in speed over other immunomagnetic Treg isolation approaches, which typically require more than 2 hours. The standard approach for isolating Tregs combines CD4+ T cell negative enrichment followed by CD25 positive selection. By contrast, our novel approach is to first perform the CD25 positive selection step with EasySep™ Releasable RapidSpheres™, a new type of magnetic particle that can be rapidly released from the isolated cells with a no-incubation, no-wash protocol performed at room temperature. Subsequent depletion of CD127high and non-CD4+ T cells is achieved by negative enrichment with EasySep™ Dextran RapidSpheres™. Starting with 5x107 PBMCs, a purity of 87.6% ± 3.1% and recovery of 2.7x105± 8.2x104 Tregs (CD4+CD127lowCD25+FOXP3+) can be achieved (n=6). This is the first EasySep™ kit to incorporate the EasySep™ Releasable RapidSpheres™ and it exemplifies the potential of this technology for use in rapidly isolating magnetic particle-free cell populations possessing complex cell surface phenotypes.

Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.

Comment cette classification a été obtenuedéplier

Prédiction machine sur la base complète

Imitation des enseignants

Ni prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.

score de la tête « metaresearch » (Codex)0,001
score de la tête « metaresearch » (Gemma)0,000
Version: metacan-v3-hybrid-931329e0061cStatut de validation: machine_predicted_unvalidated
Catégories candidatesaucune
Catégories consensuellesaucune
DomaineSignal candidat: aucune · Signal consensuel: aucune
Devis d'étudeSignal candidat: Expérimental (laboratoire) · Signal consensuel: Expérimental (laboratoire)
GenreSignal candidat: Méthodes · Signal consensuel: aucune
Score de désaccord entre enseignants0,004
Score d'incertitude au seuil0,012

Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)

CatégorieCodexGemma
Métarecherche0,0010,000
Méta-épidémiologie (sens strict)0,0010,000
Méta-épidémiologie (sens large)0,0000,000
Bibliométrie0,0000,000
Études des sciences et des technologies0,0000,000
Communication savante0,0000,000
Science ouverte0,0000,000
Intégrité de la recherche0,0000,001
Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger)0,0040,004

Scores machine (provisoires)

Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.

Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.

Tête enseignante Opus0,029
Tête enseignante GPT0,246
Écart entre enseignants0,217 · la distance entre les deux têtes enseignantes sur ce seul travail
Statut de validationscore_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle

Classification

machine, non validée

Prédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.

Les modèles n’ont appliqué aucune catégorie : rien dans la taxonomie ne correspondait à ce travail.
Devis d'étudeExpérimental (laboratoire)
Domainenon disponible
GenreMéthodes

Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».

En bref

Citations0
Publié2015
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Résumé présentoui

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