Technical note: Assessment of neutrophil endocytosis and proteolytic degradation and its relationship with phagocytosis and oxidative burst in dairy cows
Notice bibliographique
Résumé
Conventional assays of polymorphonuclear cell (PMN, neutrophil) function such as oxidative burst (OB) and phagocytosis (PC) are widely used to evaluate innate immunity in the transition period of dairy cows. Oxidative burst is commonly evaluated by measuring PMN median fluorescence intensity (MFI) involving the release of reactive oxygen species after in vitro stimulation. Phagocytosis can be measured by engulfment of fluorescent beads by PMN. DQ-ovalbumin (DQ-OVA) is a molecule suitable for the assessment of intracellular proteolytic degradation, so it might be informative about an additional pathway of pathogen handling by PMN. In this study, we evaluated the use of the DQ-OVA assay for the assessment of PMN function and the relationships among OB, PC, and DQ-OVA results in PMN isolated from blood of dairy cows between 5 and 21 d post partum. Results of the DQ-OVA validation assay were assessed with mixed linear regression models. Pearson correlation tests and kappa values for agreement were used to associate the MFI between each PMN function assay (OB, PC, and DQ-OVA). For the validation assay (9 cows in 3 replicates), PMN incubated with DQ-OVA were stimulated with IFN-γ or inhibited with cytochalasin D, and fluorescence was compared with untreated PMN. Stimulated and inhibited PMN had greater (970 ± 160 units) and lesser (593 ± 55 units) MFI relative to untreated PMN (791 ± 154 units), respectively, indicating that DQ-OVA fluorescence reflected enhanced or reduced endocytic and proteolytic function. To associate the MFI outcomes among OB, PC, and DQ-OVA, 153 samples from 40 cows were analyzed. Results showed significant, although weak association between DQ-OVA and PC MFI (Pearson r = 0.16). When values of MFI were categorized according to the first ("high" PMN functionality), second and third ("moderate" PMN functionality), or fourth ("low" PMN functionality) quartiles, agreement beyond chance (κ) was moderate: κ = 0.38 for DQ-OVA and OB, κ = 0.43 for DQ-OVA and PC, and κ = 0.43 for OB and PC. The DQ-OVA assay may complement traditional PMN functional assays because it provides additional information regarding the combination of endocytosis and proteolytic degradation, but it is not a substitute for assessment of OB or PC.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,011 | 0,008 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».