Time course analysis of sensory axon regeneration in vivo by directly tracing regenerating axons
Notice bibliographique
Résumé
Most current studies quantify axon regeneration by immunostaining regeneration-associated proteins, representing indirect measurement of axon lengths from both sensory neurons in the dorsal root ganglia and motor neurons in the spinal cord. Our recently developed method of in vivo electroporation of plasmid DNA encoding for enhanced green fluorescent protein into adult sensory neurons in the dorsal root ganglia provides a way to directly and specifically measure regenerating sensory axon lengths in whole-mount nerves. A mouse model of sciatic nerve compression was established by squeezing the sciatic nerve with tweezers. Plasmid DNA carrying enhanced green fluorescent protein was transfected by ipsilateral dorsal root ganglion electroporation 2 or 3 days before injury. Fluorescence distribution of dorsal root or sciatic nerve was observed by confocal microscopy. At 12 and 18 hours, and 1, 2, 3, 4, 5, and 6 days of injury, lengths of regenerated axons after sciatic nerve compression were measured using green fluorescence images. Apoptosis-related protein caspase-3 expression in dorsal root ganglia was determined by western blot assay. We found that in vivo electroporation did not affect caspase-3 expression in dorsal root ganglia. Dorsal root ganglia and sciatic nerves were successfully removed and subjected to a rapid tissue clearing technique. Neuronal soma in dorsal root ganglia expressing enhanced green fluorescent protein or fluorescent dye-labeled microRNAs were imaged after tissue clearing. The results facilitate direct time course analysis of peripheral nerve axon regeneration. This study was approved by the Institutional Animal Care and Use Committee of Guilin Medical University, China (approval No. GLMC201503010) on March 7, 2014.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».