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The auxin-inducible degron 2 technology provides sharp degradation control in yeast, mammalian cells, and mice

2020· article· en· 574 citations· W3102624934 sur OpenAlex· 10.1038/s41467-020-19532-z

Pourquoi ce travail est-il dans la base ?

Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.

Organisme subventionnaire canadienUn organisme canadien l'a financé. Le travail peut ne porter aucune affiliation canadienne.

Aucune affiliation canadienne. Une base fondée sur la seule affiliation (le devis habituel) n'aurait jamais vu ce travail. C'est l'un des travaux qui justifient l'inversion de la base.

Scores machine (provisoires)

Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.

Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.

Tête enseignante Opus0,012
Tête enseignante GPT0,253
Écart entre enseignants
0,241 · la distance entre les deux têtes enseignantes sur ce seul travail
Statut de validation
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle

Résumé

Protein knockdown using the auxin-inducible degron (AID) technology is useful to study protein function in living cells because it induces rapid depletion, which makes it possible to observe an immediate phenotype. However, the current AID system has two major drawbacks: leaky degradation and the requirement for a high dose of auxin. These negative features make it difficult to control precisely the expression level of a protein of interest in living cells and to apply this method to mice. Here, we overcome these problems by taking advantage of a bump-and-hole approach to establish the AID version 2 (AID2) system. AID2, which employs an OsTIR1(F74G) mutant and a ligand, 5-Ph-IAA, shows no detectable leaky degradation, requires a 670-times lower ligand concentration, and achieves even quicker degradation than the conventional AID. We demonstrate successful generation of human cell mutants for genes that were previously difficult to deal with, and show that AID2 achieves rapid target depletion not only in yeast and mammalian cells, but also in mice.

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La notice

Revue
Nature Communications
Thématique
Protein Degradation and Inhibitors
Domaine
Biochemistry, Genetics and Molecular Biology
Établissements canadiens
Organismes subventionnaires
Institute of GeneticsJapan Science and Technology AgencyJapan Agency for Medical Research and DevelopmentJapan Society for the Promotion of ScienceMinistry of Education, Culture, Sports, Science and TechnologyUniversity of DundeeAsahi Glass FoundationTakeda Science Foundation
Mots-clés
DegronGene knockdownMutantCell biologyYeastDegradation (telecommunications)Saccharomyces cerevisiaeFunction (biology)PhenotypeProtein degradationAuxinChemistryBiologyGeneBiochemistryComputer scienceUbiquitin ligaseUbiquitin
Résumé présent dans OpenAlex
oui