In Vitro Induction of Pluripotency from Equine Fibroblasts in 20% or 5% Oxygen
Notice bibliographique
Résumé
The cellular reprogramming into pluripotency is influenced by external and internal cellular factors, such as in vitro culture conditions (e.g., environmental oxygen concentration), and the aging process. Herein, we aimed to generate and maintain equine iPSCs (eiPSCs) derived from fibroblasts of a horse older than 20 years and to evaluate the effect of different levels of oxygen tension (atmospheric 20% O2, 5% O2, or 20% to 5% O2) on these cells. Fibroblasts were reprogrammed, and putative eiPSCs were positive for positive alkaline phosphatase detection; they were positive for pluripotency-related genes OCT4, REX1, and NANOG; immunofluorescence-positive staining was presented for OCT4 and NANOG (all groups), SOX2 (groups 5% O2 and 20% to 5% O2), and TRA-1-60, TRA-1-81, and SSEA-1 (only in 20% O2); they formed embryoid bodies; and there is spontaneous differentiation in mesoderm, endoderm, and ectoderm embryonic germ layers. In addition to the differences in immunofluorescence analysis results, the eiPSC colonies generated at 20% O2 presented a more compact morphology with a well-defined border than cells cultured in 5% O2 and 20% to 5% O2. Significant differences were also observed in the expression of genes related to glucose metabolism, mitochondrial fission, and hypoxia (GAPDH, GLUT3, MFN1, HIF1α, and HIF2α), after reprogramming. Our results show that the derivation of eiPSCs was not impaired by aging. Additionally, this study is the first to compare high and low oxygen cultures of eiPSCs, showing the generation of pluripotent cells with different profiles. Under the tested conditions, the lower oxygen tension did not favor the pluripotency of eiPSCs. This study shows that the impact of oxygen atmosphere has to be considered when culturing eiPSCs, as this condition influences the pluripotency characteristics.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».