20 Quantification of sBCMA in human plasma using a high-throughput mass spectrometry workflow for exploratory, CAP/CLIA or regulated studies
Notice bibliographique
Résumé
<h3>Background</h3> Bioanalytically validated methods are needed for reliable measurement of B cell maturation antigen (BCMA) in clinical samples. BCMA contributes to multiple myeloma (MM) pathophysiology and is targeted by various novel immunotherapies. Soluble BCMA (sBCMA) is a promising novel biomarker for disease monitoring and prediction. To address the need for sBCMA measurement, we developed a mass spectrometry-based assays for the quantitation of total sBCMA in plasma. <h3>Methods</h3> Immunoaffinity enrichment of sBCMA from human plasma was performed on a Agilent AssayMap Bravo platform using streptavidin cartridges. Recovered sBCMA protein was digested to peptides using trypsin, spiked with a fixed level of stable isotope labeled (SIL) peptide standard, and analyzed by multiple-reaction-monitoring (MRM) mass spectrometry. The MRM assay targeted a BCMA-specific endogenous peptide used as a surrogate measure of the protein, as well as the corresponding spiked SIL peptide at known concentration. An 8-point external calibration curve was prepared by spiking varying amounts of recombinant BCMA and fixed amounts of SIL peptides in surrogate matrix. Endogenous sBCMA levels were determined by back-calculating against the curve. To assess the performance of the method, ≥ 2 precision and accuracy runs were performed. To assess the impact of ligand or drug binding on the developed assay, performance of the assay was tested using plasma spiked at a range of concentrations with rhAPRIL, rhBAFF or simulated mAb drug. <h3>Results</h3> The developed assay allowed the quantitation of sBCMA from 1 to 1000 ng/mL. The precision and accuracy at different QC levels was within 20% CV and 20% bias. The presence of binding proteins (rhAPRIL, rhBAFF, simulated mAb) did not interfere with the measurement of sBCMA indicating that the assay measures total sBCMA. <h3>Conclusions</h3> We have developed an assay for the absolute quantitation of total sBCMA in human plasma. The assay can be analytically validated and deployed for clinical studies with a ~ 3-day turnaround time.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».