Cloning and prokaryotic expression of the full-length cDNA of CDPK gene from Leymus chinensis
Notice bibliographique
Résumé
【Objective】Cloning and prokaryotic expression of CDPK gene from Leymus chinensis would help to further study the function of it,which could probe into its molecule mechanism how L. chinensis adapts itself to the saline-alkali habitat and provide a theoretical basis. 【Method 】 CDPK gene of L. chinensis was cloned by RT-PCR and RACE technology,which was named Lc-CDPK. By constructing prokaryotic expression vector of CDPK gene and transforming it into Escherichia coli BL21( DE3) with IPTG induction,the expression of CDPK protein was analyzed by SDS-PAGE.【Result and conclusion】The full-length c DNA sequence of CDPK gene was 1 704 bp with a 1 647 bp ORF( open reading frame)encoding 548 amino acids,and the amino acids from 81 to 339 formed the S-TKc structural domains possessing catalytic activity of serine/threonine protein kinase and having four conservative EF hand structural domains. A comparison with the nucleotide sequence of coding region of L. chinensis and those of other graminaceous crops showed that it has a close similarity with CDPK gene of wheat,sharing at identity of96%. The relative molecular mass of prokaryotic expressed fusion protein was 61 350 by IPTG induction,which matched up with the anticipated theoretical value. The induced protein reached the highest level at7 hours of induction,accounting for 49. 1% in the total bacterial proteins.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».