Murine Blastocysts Release Mature MicroRNAs Into Culture Media That Reflect Developmental Status
Notice bibliographique
Résumé
Extracellular microRNA (miRNA) sequences derived from the pre-implantation embryo have attracted interest for their possible contributions to the ongoing embryonic–uterine milieu, as well as their potential for use as accessible biomarkers indicative of embryonic health. Spent culture media microdroplets used to culture late-stage E4.0 murine blastocysts were screened for 641 mature miRNA sequences using a reverse transcription–quantitative polymerase chain reaction–based array. We report here 39 miRNAs exclusively detected in the conditioned media, including the implantation-relevant miR-126a-3p, miR-101a, miR-143, and miR-320, in addition to members of the highly expressed embryonic miR-125 and miR-290 families. Based on these results, an miRNA panel was assembled comprising five members of the miR-290 family (miR-291-295) and five conserved sequences with significance to the embryonic secretome (miR-20a, miR-30c, miR-142-3p, miR-191, and miR-320). Panel profiling of developing embryo cohort lysates and accompanying conditioned media microdroplets revealed extensive similarities in relative quantities of miRNAs and, as a biomarker proof of concept, enabled distinction between media conditioned with differently staged embryos (zygote, 4-cell, and blastocyst). When used to assess media conditioned with embryos of varying degrees of degeneration, the panel revealed increases in all extracellular panel sequences, suggesting cell death is an influential and identifiable factor detectable by this assessment. In situ hybridization of three panel sequences (miR-30c, miR-294, and miR-295) in late-stage blastocysts revealed primarily inner cell mass expression with a significant presence of miR-294 throughout the blastocyst cavity. Furthermore, extracellular miR-290 sequences responded significantly to high centrifugal force, suggesting a substantial fraction of these sequences may exist within a vesicle such as an exosome, microvesicle, or apoptotic bleb. Together, these results support the use of extracellular miRNA to assess embryonic health and enable development of a non-invasive viability diagnostic tool for clinical use.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».