Role of cystein residues in the normal operation and assembly of K+‐Cl− cotransporter isoform 2 (KCC2)
Notice bibliographique
Résumé
K + ‐Cl − cotransporters (KCCs) regulate intracellular K + and Cl − concentration as well as cell volume. Their transport activity is sensitive to N ‐ethylmaleimide (NEM), a thiol reagent that alkylates available sulfhydryl groups, and their C ‐terminus can interact with other CCCs to form oligomers. These features suggest that a number of cystein residues within the KCCs play an important role in carrier activity and/or assembly. To determine whether this is the case, we have exploited a mutagenic approach using rat KCC2 as a model. Substitutions (C8G, C742G, C854G and C982G) were generated by site‐directed mutagenesis and expressed in X. laevis oocytes. Substitution C854G increased while C982G decreased Rb + transport without altering cell surface protein expression. They responded as did wild type (wt) carrier to the inhibitory effect of 250 μM furosemide but were more sensitive to the inhibitory effect of 1 mM NEM. Coimmunoprecipitation studies showed that the quantity of carriers precipitated with wt KCC2 was lower for C854G than for wt KCC2 or C982G. Lastly, FRAP studies in KCC2‐transfected HEK‐293 cells showed that NEM increased post‐bleach fluorescence recovery time in a concentration‐dependent manner. Collectively, the data suggest that C854 and C982 play an important role in KCC2 function, perhaps by supporting homo‐ and/or heterooligomeric structure formation. This work was funded by CIHR and CFI.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».