A240 OPIOID-INDUCED HYPEREXCITABILITY IN DRG NEURONS IS MEDIATED BY DOR-DEPENDENT ENDOCYTOSIS
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Background Opioids are effective for the treatment of abdominal pain but are also associated with tolerance, and increased dosing leads to severe side effects. We previously showed that prolonged exposure to high doses of opioids evoked paradoxical hyperexcitability of colonic afferent nerves that was mediated by δ-opioid receptor (DOR) signaling. Recent studies suggest that DOR-dependent analgesia is mediated not only by G proteins but also via receptor endocytosis and downstream signaling, but it is unclear what intracellular signaling mechanisms are underlying opioid-induced hyperexcitability. Aims To examine the mechanisms underlying DOR-mediated hyperexcitability of dorsal root ganglia (DRG) neurons. Methods We assessed the excitability of DRG neurons isolated from C57BL/6 mice by measuring the rheobase (minimal current to elicit an action potential, i.e. lower rheobase=increased excitability) using perforated patch-clamp recordings. Dissociated neurons were exposed to a high concentration (10 µM) of the μ-opioid receptor agonist DAMGO, the DOR agonist DADLE, or the weakly internalizing DOR agonist ARM390 overnight. To examine the role of receptor endocytosis and intracellular receptor activation underlying the excitatory effect by opioids, DRG neurons exposed to DAMGO or DADLE were preincubated with the membrane-permeable opioid receptor antagonist naloxone or the endocytosis inhibitor Pitstop2. To further understand the mechanisms involved in the hyperexcitability evoked by opioid re-exposure, following overnight incubation with high concentrations of DAMGO or DADLE, neurons were washed for 1 hr and treated either with the PKA inhibitor H89 or the PKC inhibitor GFX before re-exposure to DAMGO or DADLE at a low concentration (10 nM). Results Neurons exposed to 10 µM DAMGO or DADLE were hyperexcitable (rheobase decreased 25 % and 26 % compared to controls respectively; p≤0.05, 2-way ANOVA). Naloxone and Pitstop2 blocked the increased excitability of DRG neurons induced by overnight incubations with either DAMGO or DADLE. In contrast to the hyperexcitability induced by DAMGO and DADLE, overnight incubation with 10 µM ARM390 decreased excitability (rheobase increased 31%, p≤0.05, unpaired t-test). The hyperexcitability induced by DAMGO and DADLE was reversed after a 1 hr washout but acute reapplication of a low concentration of DAMGO or DADLE (10nM) now evoked hyperexcitability (rheobase decreased 34 and 35 % respectively, p≤0.05, 2-way ANOVA). This effect was prevented by inhibiting PKC but not PKA. Conclusions Our data suggest that the DOR-dependent hyperexcitability evoked by prolonged exposure to high concentrations of opioids is dependent on receptor endocytosis and downstream PKC signaling. Targeting these pathways could mitigate the hyperexcitability of pain signaling neurons caused by high doses of opioids. Funding Agencies CCC
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».