Human Sulfotransferase Assays With PAPS Production in situ
Notice bibliographique
Résumé
For in vitro investigations on human sulfotransferase (SULT) catalyzed phase II metabolism, the costly cofactor 3′-phosphoadenosine-5′-phosphosulfate (PAPS) is generally needed. In the present study, we developed and optimized a new approach that combines SULT-dependent biotransformation using recombinant and permeabilized fission yeast cells (enzyme bags) with PAPS production in situ applying quality by design principles. In the initial application of the procedure, yeast cells expressing human SULT1A3 were used for the production of 4′-hydroxypropranolol-4- O -sulfate from 4-hydroxypropranolol. The optimized protocol was then successfully transferred to other sulfonation reactions catalyzed by SULT2A1, SULT1E1, or SULT1B1. The concomitant degradation of some sulfoconjugates was investigated, and further optimization of the reaction conditions was performed in order to reduce product loss. Also, the production of stable isotope labelled sulfoconjugates was demonstrated utilizing isotopically labelled substrates or 34 S-sulfate. Overall, this new approach results in higher space-time yields while at the same time reducing experimental cost.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».