Pourquoi ce travail est dans la base
Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.
Notice bibliographique
Résumé
Introduction: Exosomes are small Extracellular Vesicles (sEV) formed by an endosomal route by inward budding of the lateendosome/multivesicular body (MVB) membrane. Despite in recent years much progress has been made to better define sEVcomposition and biogenesis pathways, their small size and heterogeneity pose challenges to find new reliable labelling strategies toidentify specific exosome populations. We developed an innovative methodology to metabolically label fluorescent sEV throughthe use of a fluorescent lipid (BODIPY C16) that is readily internalized by cells and is transformed into phospholipids which willform part of the lipid bilayer of the secreted vesicles.Methods: Fluorescent sEV secreted in the conditioned media of melanoma cells pulsed with BODIPY FL C16 were purifiedby differential ultracentrifugation, quantified by Flow Cytometry (FC) and Nanoparticle Tracking Analysis (NTA), sorted byFluorescence Activated Cell Sorting (FACS) and further characterized by density gradient separation and Western Blot analysisfor typical sEVs markers. Colocalization studies were performed by confocal microscopy and electron microscopy.Results: Confocal images showed colocalization of BODIPY lipids with lipid transformation sites such as ER and mitochondriaand with specific markers of late endosomes/MVB or other organelles (tetraspanins, Golgi markers, lysosomes) but not with the of ABSTRACTplasma membrane. Secretion of fluorescent sEV (Bodipy sEV) was followed over time showing an early release of Bodipy sEVinto the extracellular medium with a constant ratio of Bodipy sEV/total EVs, as determined by NTA, up to 6 hours. Bodipy sEVsecreted in the conditioned media purified by differential ultracentrifugation were separated by density gradient fractionation.Fractions analysed by FC displayed a single low density peak at 1,08-1,09 g/ml that is detergent sensitive demonstrating thatfluorescent particles are indeed lipid vesicles and contain tetraspanins (CD63, CD81 and CD9), syntenin and ESCRT componentswhen analysed by Western Blot. Electron microscopy analysis of ultracentrifuged and sorted Bodipy sEV showed that BodipysEVhavethetypicalshapeandsize(about80nm)ofasubpopulationofsEVoftenreferredtoassmallexosomes(Exo-S).Finally,colocalization studies of single Bodipy sEV with tetraspanins fluorescent antibodies showed colocalization of Bodipy sEV withCD63, CD81 and CD9.Summary/Conclusion: Taken together these results show a very specific and effective labelling of a discrete sEV subpopulationthat can be further exploited for biogenesis, internalization and functional studies. This work was supported by the Italian Ministry of Health (grant RF-2019-12369719)
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,003 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,002 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,004 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle