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Enregistrement W4306965209 · doi:10.1101/2022.10.19.512974

Glycogen degrading activities of catalytic domains of α-amylase and α-amylase-pullulanase enzymes conserved in <i>Gardnerella</i> spp. from the vaginal microbiome

2022· preprint· en· W4306965209 sur OpenAlexafffund
Pashupati Bhandari, Jeffrey P. Tingley, D. Wade Abbott, Janet E. Hill

Notice bibliographique

RevuebioRxiv (Cold Spring Harbor Laboratory) · 2022
Typepreprint
Langueen
DomaineBiochemistry, Genetics and Molecular Biology
ThématiqueEnzyme Production and Characterization
Établissements canadiensAgriculture and Agri-Food CanadaUniversity of Saskatchewan
Organismes subventionnairesAgriculture and Agri-Food CanadaNatural Sciences and Engineering Research Council of CanadaUniversity of Saskatchewan
Mots-clésMaltotriosePullulanaseMaltoseAmylaseGlycogen debranching enzymeBiochemistryBiologyGlycogenMicrobiologyEnzymeGlycogen synthase

Résumé

récupéré en direct d'OpenAlex

Abstract Gardnerella spp. are associated with bacterial vaginosis, in which normally dominant lactobacilli are replaced with facultative and anaerobic bacteria including Gardnerella spp. Co-occurrence of multiple species of Gardnerella is common in the vagina and competition for nutrients such as glycogen likely contributes to the differential abundances of Gardnerella spp. Glycogen must be digested into smaller components for uptake; a process that depends on the combined action of glycogen degrading enzymes. In this study, the ability of culture supernatants of 15 isolates of Gardnerella spp. to produce glucose, maltose, maltotriose and maltotetraose from glycogen was demonstrated. Carbohydrate active enzymes were identified bioinformatically in Gardnerella proteomes using dbCAN2. Identified proteins included a single domain α-amylase (EC 3.2.1.1) (encoded by all 15 isolates) and an α-amylase-pullulanase (EC 3.2.1.41) containing amylase, carbohydrate binding modules and pullulanase domains (14/15 isolates). To verify the sequence-based functional predictions, the amylase and pullulanase domains of the α-amylase-pullulanase, and the single domain α-amylase were each produced in E. coli . The α-amylase domain from the α-amylase-pullulanase released maltose, maltotriose and maltotetraose from glycogen, and the pullulanase domain released maltotriose from pullulan and maltose from glycogen, demonstrating that the Gardnerella α-amylase-pullulanase is capable of hydrolyzing α-1,4 and α-1,6 glycosidic bonds. Similarly, the single domain α-amylase protein also produced maltose, maltotriose and maltotetraose from glycogen. Our findings show that Gardnerella spp. produce extracellular amylase enzymes as ‘public goods’ that can digest glycogen into maltose, maltotriose and maltotetraose that can be used by the vaginal microbiota. Importance Increased abundance of Gardnerella spp. is a diagnostic characteristic of bacterial vaginosis, an imbalance in the human vaginal microbiome associated with troubling symptoms, and negative reproductive health outcomes, including increased transmission of sexually transmitted infections and preterm birth. Competition for nutrients is likely an important factor in causing dramatic shifts in the vaginal microbial community but little is known about the contribution of bacterial enzymes to the metabolism of glycogen, a major food source available to vaginal bacteria. The significance of our research is characterizing the activity of enzymes conserved in Gardnerella species that contribute to the ability of these bacteria to utilize glycogen.

Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.

Comment cette classification a été obtenuedéplier

Prédiction distillée sur la base complète

Imitation des enseignants

Ni prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.

score de la tête « metaresearch » (Codex)0,000
score de la tête « metaresearch » (Gemma)0,000
Version: codex-gemma-dda1882f352aStatut de validation: machine_predicted_unvalidated
Catégories candidatesMéta-épidémiologie (sens strict)
Catégories consensuellesaucune
DomaineSignal candidat: aucune · Signal consensuel: aucune
Devis d'étudeSignal candidat: Expérimental (laboratoire) · Signal consensuel: Expérimental (laboratoire)
GenreSignal candidat: Empirique · Signal consensuel: Empirique
Score de désaccord entre enseignants0,011
Score d'incertitude au seuil1,000

Scores Codex et Gemma par catégorie

CatégorieCodexGemma
Métarecherche0,0000,000
Méta-épidémiologie (sens strict)0,0000,000
Méta-épidémiologie (sens large)0,0000,000
Bibliométrie0,0000,000
Études des sciences et des technologies0,0000,000
Communication savante0,0000,000
Science ouverte0,0000,001
Intégrité de la recherche0,0000,000
Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger)0,0000,000

Scores machine (provisoires)

Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.

Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.

Tête enseignante Opus0,009
Tête enseignante GPT0,206
Écart entre enseignants0,196 · la distance entre les deux têtes enseignantes sur ce seul travail
Statut de validationscore_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle

Classification

machine, non validée

Prédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.

Devis d'étudeExpérimental (laboratoire)
Domainenon disponible
GenreEmpirique

Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».

En bref

Citations5
Publié2022
Routes d'admission2
Résumé présentoui

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