Abstract A077: PancreaCult™ Organoid Medium Kits support the robust establishment and expansion of human pancreatic duct organoids
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Organoid culture is a novel in vitro culture method that promotes the growth of primary and PSC-derived cells in three-dimensional culture to generate structures that recapitulate tissue morphology. We have developed PancreaCult™ Organoid Medium Kits (Human), which combine PancreaCult™ Organoid Initiation Medium (OIM) and serum-free PancreaCult™ Organoid Growth Medium (OGM) into a robust and standardized workflow for the establishment and expansion of pancreatic duct organoids. To establish organoids, fresh or cryopreserved islet-depleted exocrine tissue was seeded in Corning® Matrigel® domes and cultured in PancreaCult™ OIM. After 3 days, the medium was changed to PancreaCult™ OGM and the organoids were passaged and maintained in this medium thereafter, and passaged as fragments every 4 - 7 days. Organoids were successfully established from all 5 donors with a 2- to 6-fold expansion in cell numbers every 7 - 14 days. Real-time PCR and immunocytochemistry demonstrated that these organoids express pancreatic duct markers (PDX1, SOX9, KRT19, CFTR, CA2, and MUC1), as well as proliferation and stem cell markers, Ki-67 and LGR5, respectively. Pancreatic duct organoids could be maintained for at least 10 passages (n = 3) and cryopreserved as fragments that could be used for rapid re-establishment of cultures at later time points. Organoids could also be dissociated and re-seeded in Prostaglandin E2-free PancreaCult™ OGM supplemented with ROCK inhibitor, Y-27632 and 10% FBS on Transwell® inserts to create 2D monolayers. In addition to normal pancreatic duct cultures, PancreaCult™ OGM supported the efficient long-term expansion of 4 pre-established pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) organoid lines and maintained the mutational profile of the parent line after 5 passages, as determined through whole exome sequencing of 29 cancer-associated genes. Through the optional removal of epidermal growth factor (EGF), PancreaCult™ OGM can be modified to suppress normal cell growth to select for tumor cells with activating KRAS mutations. Our results demonstrate that PancreaCult™ Organoid Medium Kits provide a robust and flexible in vitro culture system for the establishment and expansion of normal pancreatic duct cells, as well as the long-term expansion of PDAC organoids. Citation Format: Nina Quiskamp, Angela Tsai, Joanna Pan, Misha Hasan, George Chang, Isabella T. Tai, Allen C. Eaves, Sharon A. Louis, Ryan K. Conder. PancreaCult™ Organoid Medium Kits support the robust establishment and expansion of human pancreatic duct organoids [abstract]. In: Proceedings of the AACR Special Conference on Pancreatic Cancer; 2022 Sep 13-16; Boston, MA. Philadelphia (PA): AACR; Cancer Res 2022;82(22 Suppl):Abstract nr A077.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,007 | 0,007 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».