Construction and characterization of a novel miniaturized filamentous phagemid for targeted mammalian gene transfer
Notice bibliographique
Résumé
BACKGROUND: As simplistic proteinaceous carriers of genetic material, phages offer great potential as targeted vectors for mammalian transgene delivery. The filamentous phage M13 is a single-stranded DNA phage with attractive characteristics for gene delivery, including a theoretically unlimited DNA carrying capacity, amenability to tropism modification via phage display, and a well-characterized genome that is easy to genetically modify. The bacterial backbone in gene transfer plasmids consists of elements only necessary for amplification in prokaryotes, and, as such, are superfluous in the mammalian cell. These problematic elements include antibiotic resistance genes, which can disseminate antibiotic resistance, and CpG motifs, which are inflammatory in animals and can lead to transgene silencing. RESULTS: Here, we examined how M13-based phagemids could be improved for transgene delivery by removing the bacterial backbone. A transgene cassette was flanked by isolated initiation and termination elements from the phage origin of replication. Phage proteins provided in trans by a helper would replicate only the cassette, without any bacterial backbone. The rescue efficiency of "miniphagemids" from these split origins was equal to, if not greater than, isogenic "full phagemids" arising from intact origins. The type of cassette encoded by the miniphagemid as well as the choice of host strain constrained the efficiency of phagemid rescue. CONCLUSIONS: The use of two separated domains of the f1 ori improves upon a single wildtype origin while still resulting in high titres of miniphagemid gene transfer vectors. Highly pure lysates of miniaturized phagemids could be rapidly obtained in a straightforward procedure without additional downstream processing.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».