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Enregistrement W4384283659 · doi:10.1016/j.omtm.2023.07.002

Inducible HEK293 AAV packaging cell lines expressing Rep proteins

2023· article· en· W4384283659 sur OpenAlex

Pourquoi ce travail est dans la base

Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.

affAu moins un auteur déclare une institution canadienne dans l'instantané OpenAlex épinglé.
fundUn bailleur canadien est enregistré sur le travail.

Notice bibliographique

RevueMolecular Therapy — Methods & Clinical Development · 2023
Typearticle
Langueen
DomaineBiochemistry, Genetics and Molecular Biology
ThématiqueVirus-based gene therapy research
Établissements canadiensMcGill UniversityUniversité LavalNational Research Council Canada
Organismes subventionnairesFonds de Recherche du Québec - SantéNational Research Council CanadaNatural Sciences and Engineering Research Council of Canada
Mots-clésHEK 293 cellsTransfectionCell cultureBiologyTransduction (biophysics)PlasmidTiterMolecular biologyCell biologyViral vectorActivator (genetics)Recombinant DNAGeneVirusVirologyGenetics

Résumé

récupéré en direct d'OpenAlex

Packaging or producer cell lines for scalable recombinant adeno-associated virus (rAAV) production have been notoriously difficult to create due in part to the cytostatic nature of the Rep proteins required for AAV production. The most difficult challenge being creating AAV packaging cell lines using HEK293 parental cells, currently the best mammalian platform for rAAV production due to the constitutive expression of E1A in HEK293 cells, a key REP transcription activator. Using suspension and serum-free media adapted HEK293SF carrying a gene expression regulation system induced by addition of cumate and coumermycin, we were able to create REP -expressing AAV packaging cells. This was achieved by carefully choosing two of the AAV Rep proteins (Rep 40 and 68), using two inducible promoters with different expression levels and integrating into the cells through lentiviral vector transduction. Three of our best clones produced rAAV titers comparable to titers obtained by standard triple plasmid transfection of their parental cells. These clones were stable for up to 7 weeks under continuous cultures condition. rAAV production from one clone was also validated at scale of 1 L in a wave bioreactor using serum-free suspension culture.

Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.

Prédiction distillée sur la base complète

Imitation des enseignants

Ni prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.

score de la tête « metaresearch » (Codex)0,008
score de la tête « metaresearch » (Gemma)0,001
Version: codex-gemma-dda1882f352aStatut de validation: machine_predicted_unvalidated
Catégories candidatesMéta-épidémiologie (sens strict)
Catégories consensuellesaucune
DomaineSignal candidat: aucune · Signal consensuel: aucune
Devis d'étudeSignal candidat: Expérimental (laboratoire) · Signal consensuel: Expérimental (laboratoire)
GenreSignal candidat: Empirique · Signal consensuel: aucune
Score de désaccord entre enseignants0,663
Score d'incertitude au seuil1,000

Scores Codex et Gemma par catégorie

CatégorieCodexGemma
Métarecherche0,0080,001
Méta-épidémiologie (sens strict)0,0000,000
Méta-épidémiologie (sens large)0,0010,000
Bibliométrie0,0000,001
Études des sciences et des technologies0,0000,000
Communication savante0,0000,000
Science ouverte0,0010,001
Intégrité de la recherche0,0000,001
Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger)0,0000,000

Scores machine (provisoires)

Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.

Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.

Tête enseignante Opus0,135
Tête enseignante GPT0,473
Écart entre enseignants0,338 · la distance entre les deux têtes enseignantes sur ce seul travail
Statut de validationscore_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle