Immunoelectron Microscopy of Endocytosis and Junction Proteins at Tubulobulbar Complexes in the Mammalian Testis
Notice bibliographique
Résumé
The seminiferous epithelium is the site of spermatogenesis, the cellular basis for male fertility. Large junction complexes separate the epithelium into basal and adluminal compartments, as well as attach morphologically differentiating spermatids to apical regions of Sertoli cells. During spermatogenesis, turnover of these large junction complexes enables both the next generation of spermatogenic cells to move from the basal into adluminal regions of the epithelium, and mature spermatozoa to be released into the duct system of the reproductive tract. We have proposed that unique structures termed tubulobulbar complexes (TBCs) are subcellular clathrin‐based endocytosis machines that internalize intact intercellular junctions during spermatid translocation and sperm release. If this is true, then proteins associated with endocytosis in general should be associated with TBCs. Previous immunofluorescence results have indicated that Rab5 and EEA1, together with junction proteins, are present in areas occupied by TBCs. However, association with specific compartments of TBCs at the ultrastructural level has not been done. Conventional methods of immunoelectron microscopy do not provide adequate preservation of membranes to clearly localize these proteins to TBCs. We have applied a recently published pre‐embedding protocol (Melo et al. 2014, Nature Protocols 9:2382‐2394) to the rat testis and show that Rab5 associates with the bulb region of TBCs. EEA1 is associated mainly with regions after the bulbs have been internalized. Nectin‐2 associates with junctions and with TBCs. This data supports the hypothesis that TBCs are involved with endocytosis of junction proteins. Support or Funding Information NSERC Discovery Grant to A. Wayne Vogl
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».