Integration of planktonic bacteria in the biofilm and functional analysis of the Bthur62720 gene in Bacillus thuringiensis
Notice bibliographique
Résumé
Bacillus thuringiensis is able to produce a pellicle at the air-liquid interface in glass tubes under static conditions. During biofilm formation, two populations coexist: a sessile floating population and a planktonic population, located in the culture medium beneath the pellicle. Using spectrophotometric measurements, we followed the growth of both populations during the B. thuringiensis 407 pellicle formation. Our results show that while the biofilm biomass increases rapidly, the planktonic population growth drops sharply. This decrease is not observed with the 407 spoOA mutant or for strains unable to form a biofilm, and cannot be attributed to cell lysis or cell sedimentation. Therefore, it is the result of a massive integration of planktonic cells in the preformed pellicle. We also visualized, using epi-fluorescence microscopy, the integration of planktonic bacteria of the 407 strain in its preformed biofilm. The recruited cells are located in restricted areas of the biofilm, where the density of sessile cells is low, revealing a heterogeneous spatial distribution of the immigrant cells within the biofilm. To identify the mechanisms involved in the recruitment of planktonic cells in the biofilm, we screened a bank of mutants of the 407 strain, obtained by random mutagenesis, for their ability to integrate a pre-existing biofilm. One of the mutants in the library is strongly affected in its ability to integrate a biofilm. This deficiency is caused by the disruption of the Bthur62720 gene, which is carried by the BTB-9p plasmid and encodes a 21 kDa protein. This protein has no homolog and in silico analysis predict a signal peptide, a N-terminal domain of unknown function and a C-terminal membrane domain. Using immunocytochemistry and translational fusion assays with GFP, we showed that this protein is parietal, polar and that its N-terminal domain is cytoplasmic. With a specific dye of charged membrane phospholipids, 10-N-nonyl acridine orange, we showed that the deletion of Bthur002_62720 disorganizes the lipid rafts distribution, which appear essentially polar in wild type strain 407. Moreover, this deletion strongly affects linear swimming, but not bacterial tumbling or the presence of flagella. These results allow us to hypothesis that Bthur62720 stabilizes the lipid rafts located at the cell poles. The polar localization of these rafts, required for the clustering of chemoreceptors, would be necessary to ensure a normal chemotaxis function and thus, bacterial swimming.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».