Abstract A005: A live cell PRMT5 NanoBRET™ target engagement assay querying competitive and uncompetitive modes of inhibition
Notice bibliographique
Résumé
Abstract PRMT5 is an essential arginine methyltransferase that regulates a wide spectrum of cellular processes through the methylation of histone and non-histone substrates. In PRMT5 catalysis, SAM serves as the cofactor and methyl group donor, generating a methylated guanidinium moiety on the target substrate. In normal cells, the SAM pools are maintained through the methionine salvage pathway. In 15% of cancers, a key enzyme in this pathway (MTAP) is deleted, leading to an accumulation of the intermediate MTA, which inhibits PRMT5 activity. This genetic loss of function has therefore been pursued as a collateral vulnerability in MTAP deleted cancers. To exploit this synthetic lethality, a number of novel inhibitors (such as MRTX1719) have been developed that bind cooperatively at the PRMT5/MTA complex, offering a compelling pathway to precision medicine. Here we describe a novel, live cell NanoBRET™ Target Engagement assay that enables mechanistic studies on a variety of PRMT5 inhibitors. Using a cell-permeable NanoBRET probe directed to the substrate pocket of PRMT5, both substrate- and cofactor-competitive engagement can be quantified in cells. Moreover, this method can be used to quantify MTA-uncompetitive target engagement in cells, providing a platform to measure the potency of PRMT5-MTA-drug ternary complex formation. This method serves as a first-in-class method to quantify uncompetitive target engagement in live cells, which can be applied to other model systems. Citation Format: Kelly A. Teske, Ani Michaud, Elisabeth Rothweiler, Cesear Corona, Kaitlin Dunn Hoffman, Jennifer Wilkinson, Michael Beck, James Vasta, Kilian Huber, Matthew Robers. A live cell PRMT5 NanoBRET™ target engagement assay querying competitive and uncompetitive modes of inhibition [abstract]. In: Proceedings of the AACR Special Conference in Cancer Research: Expanding and Translating Cancer Synthetic Vulnerabilities; 2024 Jun 10-13; Montreal, Quebec, Canada. Philadelphia (PA): AACR; Mol Cancer Ther 2024;23(6 Suppl):Abstract nr A005.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,002 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,005 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».