Preparation of Functionalized Mesoporous Silica Nanoparticles as Mass Tags for Potential Applications in Mass Cytometry
Notice bibliographique
Résumé
Mass cytometry (MC) is an emerging and powerful bioanalytical technique for high-dimensional single-cell analysis. While metal-chelating polymers (MCPs) have been the most successful mass tag reagents for MC, nanoparticle (NP)-based mass tag reagents are of great interest to improve the sensitivity of MC toward low-abundance biomarkers. Here we present a new structure design for potential MC probes using multifunctionalized mesoporous silica nanoparticles (MSNs), modified with zwitterionic sulfobetaine silanes and long-chain polyethylene glycol silanes (PEG 5k, M = 5000). The resulting methoxy-terminated NPs (PMSN-Zwi-mPEG 5k ) displayed uniform size, good redispersibility and colloidal stability, as well as versatility in accommodating 13 types of lanthanides. They exhibited the capacity to carry up to 7.4 × 10 4 Tb ions per NP, with negligible ion loss observed in both H 2 O and 1× PBS buffer. We investigated the interactions of these functionalized NPs with serum proteins using UV–vis, and with peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) using MC. By varying PEG 5k chain density on NP surface, we could minimize their nonspecific binding (NSB) to human serum albumin proteins, while also reducing their NSB to PBMCs at the titer of 1000 NPs/cell. Additionally, unconjugated NPs showed good compatibility with commercial Maxpar MCP mass tags in a 10-plex assay for PBMCs staining. Under these optimized conditions, N 3 -terminated NPs (PMSN-Zwi-PEG 5k -N 3 ) were synthesized and conjugated with antibiotin antibodies (Abs), resulting in effective binding of biotin Cy5 molecules. We finally compared eight different bioconjugation conditions to maximize bioconjugation efficiency with retention of Ab function. These preliminary findings demonstrate the fundamental technical capabilities and promising prospects for the future application of MSN-based mass tag reagents in MC.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».