Injection of <i>Ortho</i>‐Functionalized Tetrafluorinated Azobenzene‐Containing siRNAs into Japanese Medaka Embryos for Photocontrolled Gene Silencing
Pourquoi ce travail est dans la base
Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.
Notice bibliographique
Résumé
This article describes the detailed methodology of how to inject photoswitchable ortho-functionalized tetrafluorinated short interfering RNAs (F-siRNAs) into a single cell of stage-two Japanese medaka (Oryzias latipes) embryos and how to control gene silencing with different wavelengths of light. Many of the prior papers describing Japanese medaka embryo injections omit key information. As such, this article aims to give an in-depth explanation as to how the NanoJect III microinjector can be used for this purpose. To obtain the embryos for microinjection, adult medaka are housed under a 14-hr light, 10-hr dark cycle to mimic their natural breeding period. This induces mating at approximately the same time each day, when the lights turn on, so recently fertilized eggs can be obtained. Synthetic F-siRNAs are injected into transgenic stage-two single-cell Japanese medaka embryos expressing enhanced green fluorescent protein (eGFP). Our data demonstrate that our F-siRNAs can silence gene activity in Japanese medaka embryos expressing eGFP. Moreover, gene expression can be activated by exposing F-siRNA-injected embryos to blue light and deactivated a few days after exposure to green light. To the best of our knowledge, this marks the first reversible control of a gene-silencing oligonucleotide within an in vivo system. © 2024 The Author(s). Current Protocols published by Wiley Periodicals LLC. Basic Protocol 1: Medaka maintenance and embryo collection Basic Protocol 2: Injection of stage-two one-cell medaka embryos Basic Protocol 3: Evaluation of the F-siRNA gene-silencing ability through light activation and inactivation using blue and green light by measuring enhanced green fluorescent protein fluorescence.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle