Streamlining Sulfated Oligosaccharide and Glycan Synthesis with Engineered Mutant 6-SulfoGlcNAcases
Notice bibliographique
Résumé
Sulfation is a common, but poorly understood, post-glycosylational modification (PGM) used to modulate biological function. To deepen our understanding of the roles of various sulfated glycoforms and their relevant binding proteins, we must expand our enzymatic toolkit for their synthesis. Here, we bypass the need for both sulfotransferases and glycosyltransferases by engineering a series of mutants of a 6-SulfoGlcNAcase, from Streptococcus pneumoniae, to directly and efficiently synthesize not only the ubiquitous 6S-GlcNAc-β-1,3-Gal linkage prevalent within host glycans, but also the 6S-GlcNAc-β-1,6-GalNAc commonly observed within core-6 O-glycans, and the more exotic 6S-GlcNAc-β-1,4-GalNAc linkage. We further elaborate these into complex sulfated N-glycan and O-glycan structures of biological relevance. By utilizing the cost-effective activated donor pNP-6S-GlcNAc in conjunction with mutant GH185 6-SulfoGlcNAcases we demonstrate a simple yet powerful in vitro method for generating well-defined sulfated oligosaccharides and glycoforms for use in a variety of applications including glycan arrays, glycan remodeling, and specificity studies with carbohydrate binding proteins such as lectins.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».