A qPCR assay for the detection of Phytophthora abietivora, an emerging pathogen on fir species cultivated as Christmas trees
Notice bibliographique
Résumé
Emerging species of the Phytophthora genus are among the most important threats to global plant biodiversity, horticulture and trade. For instance, Phytophthora root rot (PRR) of Christmas trees, mainly Fraser (Abies fraseri) and balsam (Abies balsamea) firs, is responsible for an average of 10% of the observed diseased trees in plantations. Diagnosing PRR involves isolation followed by morphological and molecular identification of the causal agents. However, these methods are rarely adapted to larger scale monitoring such as in situ detection. For these applications, molecular detection of environmental DNA (eDNA) provides the fast and high-throughput results needed. Phytophthora abietivora was associated with PRR in firs (Abies spp.) cultivated as Christmas trees in the province of Québec (Canada). This study focused on developing a sensitive and specific qPCR assay targeting P. abietivora and validating its efficiency on DNA extracted from soil and roots. A set of primers and probe was designed for this assay, and parameters such as the limit of detection (LOD95%) and limit of quantification (LOQ) were measured. The assay was tested on DNA obtained from healthy-looking and PRR symptomatic Fraser and balsam firs. The assay was shown to be semi-specific because it cross-reacted with P. europaea and three other phylogenetically close species, but deemed specific in the context of PRR of firs. The LOD95% was estimated at 10 copies per reaction (Cq of 35.7) and the LOQ to 33 P. abietivora oospores per gram of soil. Out of 488 DNA samples from soil, 68 were positive for P. abietivora from which 42 (61.7%) were from PRR symptomatic trees. Only a slight overlap (3 out of 7 samples) was observed with previously obtained baiting results. This assay will be useful for rapid diagnostics of P. abietivora infected trees and as a prospecting tool to better characterize the natural distribution and dissemination of the disease.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».