Endogenous Retrovirus‐Like Particle‐Deficient CHO Cells Can be Generated by CRISPR or shRNA and Enriched Based on Cell‐Surface Expression of Retroviral Envelope Protein
Notice bibliographique
Résumé
Despite evidence that they are not functional or infective, retrovirus-like particles (RVLPs), originating from endogenous proviral sequences in Chinese hamster ovary (CHO) cells, present a safety risk for biotherapeutics manufactured using this cell line due to their resemblance to other mammalian leukemia viruses. Here, we demonstrate that CRISPR- and shRNA-based cell engineering strategies can be used to disrupt RVLP production by targeting the RVLP nucleotide sequences. Additionally, specific antibodies were generated to monitor RVLP protein expression, including RVLP envelope (Env) protein localized on the surface of CHO cells, greatly facilitating selection of RVLP-deficient clones. These modified CHO cells showed reduced RVLP production while maintaining or enhancing the ability to produce recombinant virus-like particles (VLPs), highlighting their potential application in biomanufacturing, especially for complex biologics that are incompatible with standard RVLP mitigation procedures, namely viral inactivation and nanofiltration.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».