Characterization of the Specific Binding Between Aptamers and Cytochrome <i>c</i> With Pressure‐Assisted Capillary Electrophoresis Frontal Analysis
Notice bibliographique
Résumé
ABSTRACT Cytochrome c (cyt c ) is a heme protein located in the mitochondrial intermembrane space. Because the release of cyt c is a highly specific event in apoptotic signaling, it can serve as an apoptosis‐related marker. To date, three frequently used aptamers for cyt c (Apt40, Apt61, and Apt76) have been selected and applied in the field of sensing. The response of these aptamers is not clear, partly because of their weak affinity and nonspecific binding inherent to the system. In this study, pressure‐assisted capillary electrophoresis frontal analysis (PACE‐FA) was used to characterize the interactions between the aptamers and cyt c , and an electrophoretic mobility‐based correction was introduced to obtain accurate binding constants. A nonlinear curve‐fitting approach was used for evaluating specific binding interactions in the presence of nonspecific binding. Apt76 was found to bind specifically to cyt c , exhibiting the highest binding constant (1.53 × 10 6 M −1 ), and all three aptamers interacted with cyt c at 1:1 stoichiometry. Fluorescence titrations were performed to verify the effectiveness of the reference‐free PACE‐FA method. This study demonstrates that specific binding between biomolecules has different characteristics compared to nonspecific binding and that the PACE‐FA method can be widely used in the evaluation of biological macromolecular interactions.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».