QUANTIFICATION PAR PCR QUANTITATIF COMPÉTITIF ETDÉTECTION PAR HYBRIDATION IN SITU DU ChfuGV CHEZ LESLARVES DE CHORISTONEURA FUMIFERANA(LEPIDOPTERA:TORTRICIDAE)

<p> La tordeuse des bourgeons de l'épinette (Choristoneura fumiferana) est le plus
\ngrand défoliateur des forêts boréales du Québec. Cet insecte, qui est caractérisé par des
\ninvasions importantes des populations, engendre des pertes économiques considérables
\ndans le domaine de la foresterie. Le granulovirus retrouvé chez la tordeuse (ChfuGV)
\nsemble être un agent de lutte biologique intéressant puisqu'il provoque, au laboratoire, la
\nmort de l'insecte sur une période d'environ dix jours. Afin de définir les caractéristiques
\ncontribuant à l'efficacité du granulovirus comme agent de lutte biologique, la
\ndétermination de la charge virale chez les insectes infectés et l'identification des tissus
\ncibles pour la réplication du ChfuGV ont fait l'objet de cette étude. Par l'entremise de
\nPCR quantitatif compétitif et de gels de polyacrylamide, la quantité de copies du génome
\ndu ChfuGV et la quantité de granuline ont pu respectivement être déterminés chez les
\nlarves infectées par le virus. Des hybridations moléculaires effectuées sur des coupes
\nminces d'insectes infectés ont permis d'identifier les tissus ciblés par le ChfuGV lors de
\nsa réplication. Les analyses quantitatives par PCR compétitif ont permis de mettre en
\névidence une augmentation constante du ChfuGV jusqu'au septième jour suivant
\nl'infection. Par la suite, la quantité de copies du génome viral semble diminuer. D'autre
\npart, une augmentation constante de la granuline, protéine majeure du virus, a été
\nobservée suite à l'analyse par gel de polyacrylamide. Les hybridations ont démontré la
\nprésence du génome viral dans les cellules intestinales, adipeuses et hypodermales des
\ninsectes infectés par le virus. La méthode d'hybridation in situ a permis de caractériser le
\nChfuGV comme étant un granulovirus provoquant un syndrome de type II chez son hôte.
\nCe syndrome se caractérise par la réplication du ChfuGV dans le noyau des cellules
\nintestinales, des cellules adipeuses et des cellules hypodermiques chez C. fumiferana. La
\nmise au point d'une méthode de quantification virale par PCR est un outil intéressant qui
\npourra éventuellement être utilisé lors de la production du ChfuGV à grande échelle. Elle
\npermet de déterminer la durée d'incubation des insectes infectés avant de récolter le virus. </p>

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