DNA-Driven Focusing for Protein−DNA Binding Assays Using Capillary Electrophoresis
Notice bibliographique
Résumé
A DNA-driven focusing technique is reported for protein-DNA binding assays using capillary electrophoresis. A fluorescent DNA aptamer of 84 nucleotides (RT12) was used to bind to a specific protein, human immunodeficiency virus type 1 reverse transcriptase. The aptamer-protein complexes were effectively focused, separated by capillary electrophoresis, and detected by laser-induced fluorescence (LIF). With this DNA-driven focusing, the separation efficiency of the aptamer-protein complex reached 5 million theoretical plates/m, and the sensitivity for the detection of this complex was improved by 70-120-fold. The DNA-driven focusing technique was further applied to protein-DNA binding assays and to enhance the detection of DNA adducts. DNA adducts present in short oligonucleotides or genomic DNA were recognized by and bound to specific antibodies, and the complexes were focused electrophoretically and detected by LIF. The results demonstrate that the DNA-driven focusing can improve separation, sensitivity, and speed of analysis. The focusing is tolerant to high-salt medium, which is usually necessary to support physiological protein-DNA binding. This technique may be applied to nucleic acid analysis, aptamer affinity analysis, immunoassays for DNA damage, and DNA/RNA based binding assays.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».