Ampliseq for Illumina Technology Enables Detailed Molecular Epidemiology of Rabies Lyssaviruses from Infected Formalin-Fixed Paraffin-Embedded Tissues
Notice bibliographique
Résumé
Whole genome sequencing of rabies lyssaviruses (RABVs) has enabled the generation of highly detailed phylogenies that reveal viral transmission patterns of disease in reservoir species. Such information is highly important for informing best practices with respect to wildlife rabies control. However, specimens available only as formalin fixed paraffin embedded (FFPE) samples have been recalcitrant to such analyses. Due to the damage inflicted by tissue processing, only relatively short amplicons can be generated by standard RT-PCR methods, making the generation of full-length genome sequences very tedious. While highly parallel shotgun sequencing of total RNA can potentially overcome these challenges, the low percentage of reads representative of the virus may be limiting. Ampliseq technology enables massively multiplex amplification of nucleic acids to produce large numbers of short PCR products. Such a strategy has been applied to the sequencing of entire viral genomes but its use for rabies virus analysis has not been reported previously. This study describes the generation of an Ampliseq for Illumina primer panel, which was designed based on the global sequence diversity of rabies viruses, and which enables efficient viral genome amplification and sequencing of rabies-positive FFPE samples. The subsequent use of such data for detailed phylogenetic analysis of the virus is demonstrated.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,004 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,002 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».