Evidence of isochorismate channeling between the <i>Escherichia coli</i> enterobactin biosynthetic enzymes <scp>EntC</scp> and <scp>EntB</scp>
Pourquoi ce travail est dans la base
Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.
Notice bibliographique
Résumé
as a micronutrient. EntC and EntB are the first two enzymes in the enterobactin biosynthetic pathway. Isochorismate, produced by EntC, is a substrate for EntB isochorismatase. By using a competing isochorismate-consuming enzyme (the E. coli SEPHCHC synthase MenD), we found in a coupled assay that residual EntB isochorismatase activity decreased as a function of increasing MenD concentration. In the presence of excess MenD, EntB isochorismatase activity was observed to decrease by 84%, indicative of partial EntC-EntB channeling (16%) of isochorismate. Furthermore, addition of glycerol to the assay resulted in an increase of residual EntB isochorismatase activity to approximately 25% while in the presence of excess MenD. These experimental outcomes supported the existence of a substrate channeling surface identified in a previously reported protein-docking model of the EntC-EntB complex. Two positively charged EntB residues (K21 and R196) that were predicted to electrostatically guide negatively charged isochorismate between the EntC and EntB active sites were mutagenized to determine their effects on substrate channeling. The EntB variants K21D and R196D exhibited a near complete loss of isochorismatase activity, likely due to electrostatic repulsion of the negatively charged isochorismate substrate. Variants K21A, R196A, and K21A/R196A retained partial EntB isochorismatase activity in the absence of EntC; in the presence of EntC, isochorismatase activity in all variants increased to near wild-type levels. The MenD competition assay of the variants revealed that while K21A channeled isochorismate as efficiently as wild-type EntB (~ 15%), the variants K21A/R196A and R196A exhibited an approximately 5-fold loss in observed channeling efficiency (~3%). Taken together, these results demonstrate that partial substrate channeling occurs between EntC and EntB via a leaky electrostatic tunnel formed upon dynamic EntC-EntB complex formation and that EntB R196 plays an essential role in isochorismate channeling.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,003 | 0,002 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle