Simultaneous Determination of Lyso-Gb1 and Lyso-Gb3 in Plasma Using Salt-Assisted Liquid–Liquid Extraction Combined with LC–MS/MS
Notice bibliographique
Résumé
High Resolution Image Download MS PowerPoint Slide Background: Lyso-Gb1 and Lyso-Gb3 are key biomarkers for Gaucher type 1 and Fabry diseases, offering high diagnostic accuracy and utility in disease monitoring. However, conventional sample preparation workflows for their LC–MS/MS quantification often require large volumes of organic solvents, generate hazardous waste, and involve time-consuming steps, limiting routine applicability. Objective: This study aimed to develop, validate, and apply a rapid, sensitive, and environmentally friendly LC–MS/MS method using salt-assisted liquid–liquid extraction (SALLE) for the simultaneous determination of Lyso-Gb1 and Lyso-Gb3 in human plasma. Methods: The SALLE procedure was optimized for extraction-solvent type and volume, salt type, and concentration, with heptane (450 μL) and ammonium acetate (5 M) selected as optimal conditions to achieve high recovery and minimal matrix effects. Method validation was performed according to ICH M10 guidelines, evaluating selectivity, linearity, accuracy, precision, recovery, matrix effect, carry-over, dilution integrity, stability, and reinjection reproducibility. Clinical applicability was assessed in two independent real-sample applications: (i) 31 healthy individuals and 20 Gaucher type 1 patients for Lyso-Gb1, and (ii) 29 healthy individuals and 13 Fabry disease patients for Lyso-Gb3. Result: The method demonstrated excellent linearity for Lyso-Gb1 (0.380–200 ng/mL, R 2 = 0.9890) and Lyso-Gb3 (0.756–200 ng/mL, R 2 = 0.9982), with low LLOQs (0.380 and 0.756 ng/mL, respectively), recoveries of 92.5–109.9%, and negligible matrix effects. In clinical samples, Lyso-Gb1 and Lyso-Gb3 concentrations were significantly higher in their respective patient groups compared to healthy controls ( p < 0.0001). ROC analysis showed perfect discrimination for both biomarkers (AUC = 1.000), with optimal cut-offs of 5.80 ng/mL for Lyso-Gb1 and 3.334 ng/mL for Lyso-Gb3, each yielding 100% sensitivity and specificity. Conclusion: The developed SALLE–LC–MS/MS workflow is robust, high-throughput, and fully compliant with green-chemistry principles, using minimal organic solvent, reducing hazardous waste, and shortening the preparation time. Its excellent analytical performance and perfect clinical discrimination support its integration into routine diagnostic laboratories for the efficient diagnosis and monitoring of Gaucher type 1 and Fabry diseases.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».